毕赤酵母电转化法感受态细胞的制备步骤

1、首先，在YPD平板上划线毕赤酵母X33菌株，在28-30摄氏度培养两天，以得到分散的单菌落。

3、然后，取300微升的培养物接种至含有150ml新鲜YPD培养基的500ml三角之气苍芰摇瓶中，在28-30摄氏度205-300r/min培养过夜，约十小时至OD600达到1.3-1.5.

5、然后，在4摄氏度1500g离心五分钟，弃上清液后用75ml的冰预冷的无菌水将菌体沉淀重悬。

7、最后，在4摄氏度1500g离心五分狙拄干喔钟，弃上清液后用300微升的冰预冷的1mol/l的山梨醇溶液将菌体沉淀重悬，其终体积约为500微升，移至0.5ml的离心管中，进行冰浴待转化。