树突状细胞如何能培养好

 时间:2024-10-20 11:58:07

1、从医院或者红十字会血液中心取得献血者的白细胞浓缩液。

树突状细胞如何能培养好

3、用3ml吸管吸去上层的血浆,再吸出乳白色的PBMCs至50 ml离心管中,将白色层的PBMCs(4-7 ml)吸至50 ml离心管中,可以尽量少吸红细胞,等体积加入室温预热的PBS溶液;

4、取一个50ml什置葆鸳离心管,加入室温预热(或37℃)的7ml Ficoll-Paque (Amersham,1.077g/ml像粜杵泳),再将样品1沿管壁小心加入至Ficoll溶液上方,800g离心30min(离心机的升速度调节为5,降速度调至0),离心结束后,50ml离心管依次分为四层:血浆、PBMCs、Ficoll层和红细胞层

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7、计数取5×105个细胞铺12孔板 (根据实验要求确定需要的12孔板数楫默礤鲼目), 培养基RPMI1640含有10% FBS,37℃,5.0% CO2,培养1小时。剩余细胞按2×107cells/ml,冻存于液氮罐中

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