如何制备高密度双歧杆菌菌悬液

1、配制MRS肉汤培养基，配制MRS肉汤培养基的时候要注意加入抗坏血酸钠，因为双歧杆菌是厌氧的益生菌，很容易受到氧气的毒害。

2、MRS肉汤经118℃灭菌15min冷却后，将两歧双歧杆菌BB01和BB03（我们实验室自己命名）的冻干菌粉分别接种于灭菌后冷却后的培养基中，37℃恒温培养24h。然后取出，再接种于另一个灭菌后冷却了的培养基中；依次接种三次培养。我们使用的培养基都是用厌氧管（带盖的）进行培养。因为双歧杆菌事厌氧的。

3、将培养后的双歧杆菌和培养基混合液，倒入离心管中，用离心机4000转，15min,滤掉上清液便可以得到双歧杆菌菌泥。用0.85%的生理盐水，适当稀释便得到高浓度的双歧杆菌菌悬液。