Western blot化学发光时,胶片条带很弱怎么办

 时间:2024-10-15 05:02:13

Western blot化学发光(ECL)时,胶片上条带很弱,是什么原因

条带弱的原因可能有以下几个方面

1、因为蛋白上样量低或目的蛋白在来源组织或细胞中的表达量并不丰富造成。可适当加大蛋白上样量,也可通过提高抗体稀释度或采用灵敏度更高的发光底物来调整,如Enlight-plus。

2、蛋白没有充分转移到膜上。转膜后可通过预染Marker判断转膜效率,也可用丽春红染膜、用考马斯亮蓝染胶,判断转膜效率。

3、抗体效价不高,用量不足,孵育时间太短,或抗体反复使用保存不当而失活。可考虑更换效具弈蚕芗价更高的抗体,或提高抗体稀释度,延长抗体孵育时间;若怀疑抗体失活,可用斑点杂交实验确定抗体活性。

4、曝光时间太短。可适当延长曝光时间。

  • 母亲节快乐!盘点华语电影九大经典母亲形象!
  • 如何调节PPT中备注文字的大小
  • 如何利用ppt绘制任意正多边形
  • PPT如何修改页面尺寸的操作方法
  • 企业微信怎么查看视频会议记录
  • 热门搜索
    江苏旅游地图 清远旅游景点 夏威夷旅游攻略 成都周边旅游景点介绍 广东旅游地图 德清旅游 香港旅游签证 塞舌尔旅游 西安旅游集团 苏州西山旅游攻略