多肽的荧光标记技术(FITC修饰/AMC修饰)

 时间:2024-10-12 06:05:25

1、下面是一些常用的多肽修饰荧光物质:

多肽的荧光标记技术(FITC修饰/AMC修饰)

3、 FITC修饰异硫氰酸荧光素(FITC)具有比较高的活性,通常来说,在固相合成过程中引入该种荧光基团相对于其他荧光素要更容易,并且反应过程中不需要加入活化试剂。我们公司合成的FITC修饰的多肽通常主要有两种形式:(1)在整条肽链末端接入FITC,并且在FITC之前接入一分子的Acp(6-氨基己酸),也称烷基间隔器。反应中FITC与肽链上裸露的-NH2反应,Acp的接入提供了六个碳的直链空间,大大降低了反应的空间位阻,提高了反应效率,降低了反应难度。其次,FITC还与多肽结构中的-SH,侧链-NH2反应,Acp的加入也降低了这种副反应发生的可能。此外,多肽在酸性环境条件下切割时,在N端接入FITC的多肽需要经历环化作用来形成荧光素,这种过程通常都会伴随最后一个氨基酸的切除,而烷基间隔器Acp的接入就避免了这一情况的发生。(2)在整条肽中的某个Lys侧链接入FITC,Lys侧链为末端为-NH2的四碳直链烷基,直接起到了降低空间位阻的作用。这种修饰方式能够灵活的在整条肽中任何位置进行FITC修饰,而不仅仅局限于末端。我们所采用的FITC修饰多肽的两种形式,都具有操作简便,成功率高,容易分离纯化等优点。

多肽的荧光标记技术(FITC修饰/AMC修饰)
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